單細胞測序技術現(xiàn)已被廣泛應用于腫瘤學,發(fā)育學,和神經科學等多個生物醫(yī)學領域,并通過多組學的聯(lián)合分析,在醫(yī)學研究領域展現(xiàn)出廣闊的發(fā)展前景。于此同時,隨著Smart-seq2,Drop-seq,以及SPLiT-seq等單細胞測序技術的推陳出新,BD Rhapsody和10×Genomics商業(yè)化單細胞測序平臺的出現(xiàn),單細胞測序的通量及應用范圍也在不斷加深。
由于植物細胞制備的限制,植物單細胞研究稍晚于動物領域,但自2019年以來,植物領域共有7篇單細胞文章被發(fā)表,這充分說明單細胞測序在植物領域已經開始生根發(fā)芽,在不遠的將來單細胞測序技術在植物領域也將會開枝散葉,結出更多壯碩美味的果實。
一、文獻分享
本期我們將以國內首篇單細胞文章為例,為大家簡單介紹一下植物單細胞轉錄組測序的相關進展。
2019年4月,國際期刊Molecular Plant在線發(fā)表了中國科學院分子植物科學卓越創(chuàng)新中心/植物生理生態(tài)研究所王佳偉課題組的研究結果“A Single-Cell RNA Sequencing Profiles the Developmental landscape of Arabidopsis Root”。
實驗設計
物種與材料:85個擬南芥根尖(0.5cm長根尖區(qū)域)
材料處理:Cellulase R-10,Macerozyme R-10
單細胞平臺:10×Genomics
測序平臺:Illumina NovaSeq
分析細胞數:7695 Cells
結果展示
植物根系通過對水分、礦質元素的吸收和轉運,為植物生長發(fā)育提供著營養(yǎng)支撐。植物根系細胞組成的異質性,是植物根系實現(xiàn)功能的基礎。
圖一擬南芥根冠細胞的異質性
研究人員利用單細胞測序技術,成功解析擬南芥根冠細胞的異質性,通過tSNE和UMAP等算法(圖一)構建擬南芥根系發(fā)育圖譜,鑒定了24個細胞類型,確定了根冠不同細胞的Marker genes。
圖二 細胞間離子同化和激素響應的獨特性
圖三 細胞分裂素對側根根冠的調節(jié)
本研究進一步利用UMAP的展示效果(圖二),體現(xiàn)出植物激素和離子同化在細胞類型間的不同。如生長素合成(IAA biosynthesis)和油菜素甾醇合成(BR biosynthesis)主要集中在韌皮部和中柱鞘(cluster1 和 cluster7),并利用熒光標記(DR5生長素響應元件,TCSn細胞分裂素響應元件)和突變體植物,驗證了生長素和細胞分裂素在根系細胞間分布的差異,證明了細胞分裂素在表皮細胞分化和側根根冠發(fā)育過程中的重要性(圖三)。
總的來說,本研究利用單細胞測序技術重構擬南芥根系轉錄圖譜,為植物發(fā)育學研究提供了新的思路和方法。
文獻鏈接:https://doi.org/10.1016/j.molp.2019.04.004
三、 文章統(tǒng)計
小編將2019年植物領域發(fā)表的7篇單細胞文章進行了匯總整理,后臺留言“植物單細胞文章”獲取原文~