口腔白斑病（oral leukoplakia，OL）是最重要的口腔潛在惡性疾患之一，上皮異常增生是其病理學特征，且因口腔部位相對表淺易于觀測，可作為全身癌前病變的代表性疾病，是癌前病變發(fā)生發(fā)展的良好研究模型。但現(xiàn)階段的藥物治療、手術(shù)、激光、冷凍、光動力等療法均不能有效降低口腔白斑病的癌變率，并且口腔白斑病還存在易復發(fā)、多發(fā)、多次癌變等臨床困境。因此，針對口腔白斑病研發(fā)具有抑制和逆轉(zhuǎn)作用的全身用藥，特別是對于口腔黏膜具有區(qū)域化癌變潛能的患者，具有重要的臨床意義和社會價值。

上海交通大學醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院口腔黏膜病科副主任醫(yī)師施琳俊，上海交通大學基礎(chǔ)醫(yī)學院生化細胞系碩士生楊于權(quán)，博士生李夢瑩為該論文的共同第一作者；上海交通大學基礎(chǔ)醫(yī)學院的賈浩副研究員，侯照遠研究員及醫(yī)學院附屬第九人民醫(yī)院口腔黏膜病科沈雪敏主任醫(yī)師為該論文的共同通訊作者。該文章發(fā)表在Molecular Therapy雜志（IF=11.454）上，題目為“LncRNA IFITM4P promotes immune escape by up-regulating PD-L1 via dual mechanism in oral carcinogenesis”。

烈冰生物參與了本研究中的轉(zhuǎn)錄組測序和部分數(shù)據(jù)分析工作，本期文獻分享，我們也有幸邀請了文章的作者施琳俊副主任醫(yī)師從第一視角為大家進行詳細的文章解析，下面跟隨我們的步伐一起看看文章的研究思路和成果吧~

技術(shù)手段

lncRNA+轉(zhuǎn)錄組測序，qRT-PCR免疫組化（mIHC），免疫共沉淀（co-IP）

RNA免疫沉淀（RIP），染色質(zhì)免疫共沉淀（CHIP），Western Blot等

實驗分組

正常黏膜（NM) 、口腔白斑病（ OL ）和口腔鱗狀細胞癌（OSCC）組織樣本

研究結(jié)果

01 IFITM4P與口腔白斑病程進展高度相關(guān)

通過高通量篩選，作者發(fā)現(xiàn)相較于正常組織樣本（NM），lncRNA IFITM4P在口腔黏膜白斑病/鱗癌組織（OL/OSCC）中存在高表達，且隨著病程的進展其表達水平也在逐漸升高，該結(jié)果也與qRT-PCR、RNA scope等實驗的驗證結(jié)果相一致。

02 IFITM4P可作為口腔白斑病惡變的指標

為確定IFITM4P在口腔癌變過程中的作用，研究者利用慢病毒載體轉(zhuǎn)染口腔白斑細胞系Leuk-1和口腔鱗癌細胞系HN4，結(jié)果發(fā)現(xiàn)外源IFITM4P可顯著促進這兩種細胞的增殖，動物實驗驗證發(fā)現(xiàn)，相較于對照組，IFITM4P過表達促進了口腔鱗癌的發(fā)展，這表明IFITM4P可作為診斷口腔黏膜白斑惡變的指標。

03 PD-1抗體抑制疾病惡性進展

進一步，作者利用高通量篩選，發(fā)現(xiàn)PD-L1的表達水平隨著惡變程度的增加而升高。此外，作者在實驗中首次構(gòu)建了LPS（脂多糖）聯(lián)合4NQO誘導的“炎癥-口腔白斑小鼠模型”，動物實驗證實炎癥刺激可以加速舌白斑小鼠模型惡性進展。通過給患病小鼠注射PD-1抗體后，發(fā)現(xiàn)PD-1抗體可以顯著阻斷口腔白斑惡性進展，且在炎癥誘發(fā)的小鼠白斑惡性進展模型中的抑制效果更好。

04 口腔黏膜白斑病免疫逃逸機制

在機制分析層面，作者發(fā)現(xiàn)相較于正常組織，IFITM4P受LPS刺激后可以進行核質(zhì)穿梭，具體來說：在細胞質(zhì)內(nèi)，IFITM4P與SASH1形成復合體，通過磷酸化激活了TAK1-NF-κB途徑，NF-κB的入核促進了PD-L1的表達。此外，LPS也可以促進IFITM4P的進入細胞核，在核內(nèi)進一步招募去甲基化酶KDM5A并抑制了PTEN的表達，進而削弱了PTEN對PD-L1的抑制作用，升高了PD-L1的表達水平。IFITM4P通過胞質(zhì)和胞核兩種機制協(xié)同促進了口腔白斑/鱗癌細胞中PD-L1的表達，促使口腔黏膜白斑病發(fā)生免疫逃逸。

文章總結(jié)

研究人員利用口腔白斑病組織和口腔鱗癌組織樣本通過高通量篩選的方法，分析發(fā)現(xiàn)了IFITM4P和PD-L1的表達水平隨著組織惡性程度的增加而升高，IFITM4P可作為早期診斷口腔黏膜白斑病惡變的指標。同時研究團隊利用動物模型也發(fā)現(xiàn)了IFITM4P高表達的荷瘤小鼠對PD-1單抗的響應更好，可考慮將PD-1單抗作為治療高表達IFITM4P口腔黏膜白斑的有效治療手段。

原文鏈接

https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2022.01.003